?  熒光染色后一般在1h內(nèi)完成觀察，或于4℃保存4h，時間過長 ，會使熒光減弱。

?  每次試驗時 ，需設(shè)置以下三種對照：

–  陽性對照：陽性血清+熒光標(biāo)記物

–  陰性對照：陰性血清+熒光標(biāo)記物

–  熒光標(biāo)記物對照：PBS+熒光標(biāo)記物

?  標(biāo)本片需在操作的各個步驟中，始終保持濕潤，避免干燥。

?  一抗和二抗應(yīng)始終保持在標(biāo)本片上，避免因放置不平使液體流失，從而造成非特異性熒光染色。