目的：人類α？ Synuclein（α？Synuclein，α？SYN）A30P突變體如何在轉(zhuǎn)基因大鼠中建立帕金森氏病（PD）模型？

　　方法：使用慢病毒系統(tǒng)的野生型α？ SYN矢量pLKO？ CMV？ α？ SYN？ WT？ P2A？ GFP和α？ SYNA30P突變載體pLKO？ CMV？ α？ SYN？ A30P？ P2A？將GFP分別轉(zhuǎn)染到293FT細(xì)胞中，并將WB瞬時(shí)轉(zhuǎn)染24小時(shí)。檢測(cè)α表達(dá)水平？ SYN？慢病毒包裝后？濃縮后，使用立體定向技術(shù)將病毒稀釋劑注入大鼠的實(shí)質(zhì)黑質(zhì)緊致部分α2中。您是否過表達(dá)SYN野生型和A30P突變型慢病毒顆粒？通過免疫熒光染色，α？檢測(cè)到SYN和酪氨酸的分布是羥化酶（酪氨酸羥化酶，TH），您是否觀察到中腦實(shí)質(zhì)密集的黑質(zhì)部分中多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量的變化？旋轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)評(píng)估注射A30P慢病毒的大鼠行為改變？

　　結(jié)果：野生型和突變型A30P基因表達(dá)載體在293FT細(xì)胞中是α嗎？ SYN蛋白可以高表達(dá)嗎？ TH的免疫熒光結(jié)果表明：α？與病毒稀釋組相比： SYN野生型過表達(dá)型和A30P突變型大鼠均可引起實(shí)質(zhì)性黑質(zhì)（中腦的緊縮部分α？）中多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量的減少。 SYNA30P慢病毒注射組中缺少更多的中腦實(shí)質(zhì)神經(jīng)元，這是重要的區(qū)別嗎？發(fā)現(xiàn)在該區(qū)域中，A30P轉(zhuǎn)基因大鼠的大腦神經(jīng)元缺陷部分的免疫熒光大部分被TH染色。表明參與了SYN蛋白的聚集，并且TH表達(dá)的急劇下降進(jìn)一步是α？ SYNA30P的多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量減少并退化嗎？此外，旋轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，αα過表達(dá)。是否表明SYNA30P大鼠表現(xiàn)出明顯的進(jìn)行性運(yùn)動(dòng)功能障礙？

　　結(jié)論：人類α？通過慢病毒系統(tǒng)建立了SYNA30P突變型轉(zhuǎn)基因大鼠的PD模型，為PD的發(fā)病機(jī)理和藥物開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。