【課題實(shí)驗(yàn)整體外包】-谷氨酰胺聯(lián)合臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植在大鼠腸缺血再灌注損傷中的作用
發(fā)布人:biologicalnj
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發(fā)布時間:2021-07-15
目的:探討谷氨酰胺聯(lián)合臍血間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)移植對大鼠腸缺血再灌注損傷的作用。
方法:移植前體外復(fù)蘇培養(yǎng)臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞,CM-DiI熒光標(biāo)記后觀察臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的位置。 80只SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、缺血再灌注損傷組、谷氨酰胺組、MSC移植組和每組15只大鼠的聯(lián)合組。對照組接受生理鹽水灌腸,受傷組接受TNB(S乙醇稀釋)灌腸。 TNBS造模后1小時,谷氨酰胺組尾靜脈接受0.45g/kg谷氨酰胺,MSC移植組接受1倍灌腸。尾靜脈。1010/L臍血間充質(zhì)干細(xì)胞懸液,聯(lián)合組接受0.45 g/kg尾靜脈谷氨酰胺+臍血間充質(zhì)干細(xì)胞懸液1×1010/L.. ELISA檢測各組大鼠血清中小腸脂肪酸結(jié)合蛋白(IFABP)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;檢測再灌注后1、3小時的含水量: 谷氨酰胺聯(lián)合 MSC 移植后大鼠腸黏膜上皮細(xì)胞中 caspase-3、NF-kB 和 Bcl-2 mRNA 和蛋白質(zhì)的T 表達(dá) - 通過 PCR 和蛋白質(zhì)印跡觀察。
結(jié)果:熒光追蹤觀察到移植的MSC細(xì)胞分布在腸黏膜淋巴組織和腺上皮細(xì)胞之間,MSC可能參與了腸道缺血再灌注損傷的修復(fù)過程,表明存在性。各組大鼠血清SOD、IFABP、IL-6水平變化比較。傷組血清IFABP、IL-6水平明顯高于對照組,但谷氨酰胺組比較MSC移植組及聯(lián)合組與傷組及對照組傷者血清中與對照組相比,SOD含量顯著降低,但谷氨酰胺組、MSC移植組和聯(lián)合組的SOD含量明顯高于聯(lián)合組。組合組的增幅更大。顯然(P0.05)。與對照組相比,損傷腸黏膜上皮細(xì)胞中Caspase-3和NF-kB mRNA和蛋白表達(dá)顯著上調(diào),Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)顯著下調(diào)(Pu003c0。05),但兩組均與組合組相比。區(qū)別很重要(Pu003c0.05)。
結(jié)論:谷氨酰胺組和MSCs移植后,大鼠腸道缺血再灌注損傷程度明顯減輕。通過抑制和促進(jìn)caspase-3和NF-kB的表達(dá),減少腸黏膜缺血再灌注。