目的:采用C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst型乙肝病毒轉(zhuǎn)基因小鼠與rAAV8-1.3HBV腺相關(guān)病毒 轉(zhuǎn)染小鼠聯(lián)合CCl4腹腔注射誘導(dǎo)乙肝肝纖維化小鼠模型,比較兩種小鼠模型的病毒學(xué)及生化病理特點?

　　方法:實驗分野生型對照組(WT)?rAAV8-1.3HBV轉(zhuǎn)染組(rAAV)?CCl4組(CCl4)?rAAV8-1.3HBV 復(fù)合 CCl4 模型組 (rAAV+CCl4),C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst乙肝病毒轉(zhuǎn)基因組(Tg)?轉(zhuǎn)基因復(fù)合CCl4 組(Tg+CCl4),共計造模12周?ELISA試劑盒測定血清HBsAg?HBeAg水平,熒光定量PCR法檢測血清HBV-DNA載量,肝組織石蠟切片免疫組化染色觀察肝內(nèi)HBsAg及HBcAg的表達,生化試劑盒測定血清ALT?AST?AKP,鹽酸水解法檢測肝組織羥脯氨酸(Hyp)含量?HE染色及天狼星紅染色觀察炎癥與膠原等病理變化?

　　結(jié)果:除WT組?CCl4組,其余各組ELISA檢測血清HBsAg?HBeAg均呈陽性,同時熒光定量PCR檢測HBV-DNA載量均高于1.0×104IU/mL?其中Tg+CCl4組HBsAg?HBeAg含量高于rAAV+CCl4組?rAAV?rAAV+CCl4組HBV-DNA水平高于Tg?Tg+CCl4組?免疫組化表明:除WT組?CCl4組,其余各組肝組織中HBsAg與HBcAg均呈陽性?rAAV組對比Tg組,HBsAg表達減少;rAAV組相比Tg組,HBcAg表達明顯增多?Tg+CCl4與rAAV+CCl4相比,HBsAg結(jié)果無明顯差異,rAAV+CCl4組HBcAg陽性表達明顯增高?生化結(jié)果顯示:CCl4組?Tg+CCl4組?rAAV+CCl4組血清ALT?AST及肝組織Hyp含量均顯著升高;其中Tg+CCl4組Hyp含量高于rAAV+CCl4組?AKP結(jié)果對比WT組無明顯差異?病理結(jié)果表明:對比WT組,rAAV與Tg組炎癥與膠原沉積不明顯;CCl4組?Tg+CCl4組?rAAV+CCl4組炎癥反應(yīng)及膠原沉積明顯增高,其中Tg+CCl4組膠原沉積高于rAAV+CCl4組?

　　結(jié)論:兩種復(fù)合模型符合乙肝肝纖維化模型需求,其差異主要集中于病毒學(xué)指標以及病理改變?rAAV+CCl4組在HBV-DNA載量上具有優(yōu)勢,Tg+CCl4組在纖維化進展更為明顯?