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【動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)】-A型肉毒素重鏈干預(yù)對(duì)大鼠脊髓損傷后生長(zhǎng)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

  目的: 探討人工重組A 型肉毒素重鏈對(duì)在體大鼠脊髓損傷局部生長(zhǎng)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響, 為闡明BoNT/ A 重鏈促神經(jīng)突起再生機(jī)制提供依據(jù)。

  方法: 建立大鼠單側(cè)腰段脊髓橫斷損傷模型并局部及鞘內(nèi)給予BoNT/ A 重鏈;對(duì)用藥后不同時(shí)間局部骨髓組織進(jìn)行雙向電泳檢測(cè)總體蛋白表達(dá);選擇生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(GAP-43)和頸上神經(jīng)節(jié)蛋白10(SCG 10)進(jìn)行蛋白印跡和免疫熒光檢測(cè)以觀察二者在BoNT/ A 重鏈影響下的表達(dá)及分布。

  結(jié)果: (1)單側(cè)腰髓離斷損傷模型動(dòng)物呈現(xiàn)明顯單側(cè)運(yùn)動(dòng)及感覺(jué)功能障礙;(2)脊髓損傷后給予BoNT/A 重鏈可影響損傷局部蛋白表達(dá)譜變化:BoNT/ A 重鏈可引起損傷局部蛋白點(diǎn)群在變化的基礎(chǔ)上逆轉(zhuǎn)或表達(dá)進(jìn)一步增加,尤以MW 位于35 ~45 kDa 及18 ~25 kDa。等電點(diǎn)在5 ~7 范圍的蛋白點(diǎn)表現(xiàn)明顯;(3)蛋白印跡和免疫熒光染色結(jié)果提示: BoNT/ A 重鏈可促進(jìn)p-GAP 43 和SCG 10 的表達(dá)(P< 0.05),且p-GAP 43 及SCG 10 主要以損傷周?chē)?xì)胞陽(yáng)性明顯,胞漿及突起皆呈陽(yáng)性。

  結(jié)論: 脊髓損傷后給予BoNT/ A 重鏈可促進(jìn)脊髓損傷后選擇性生長(zhǎng)相關(guān)蛋白p-GAP 43 和SCG 10 的表達(dá)。

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