目的：探究ripply1基因在斑馬魚早期背腹軸發(fā)生過程中的作用。

　　方法：利用斑馬魚整封原位雜交技術揭示ripply1基因在斑馬魚早期胚胎發(fā)育過程中的表達模式,通過顯微注射技術在胚胎1細胞期注射ripply1的mRNA來高表達Ripply1蛋白并在后期觀察胚胎背腹標記基因的變化及胚胎形態(tài)變化。利用Tol2轉基因技術構建ripply1啟動子驅動的GFP轉基因魚。

　　結果：原位雜交結果顯示ripply1基因在斑馬魚原腸早期胚盾期特異表達在胚盾處,即預定的背部。高表達ripply1后,在胚盾期背部標記基因表達范圍擴大,腹部標記基因表達減弱,受精后24小時胚胎表現(xiàn)出嚴重的背部化表型:頭部增大,腹部卵黃延伸減弱,尾部軀干及尾部區(qū)域減少,有的甚至形成了第二個體軸。得到的轉基因魚揭示ripply1母源表達,并且轉錄起始位點上游1200個堿基驅動的GFP能模擬內源基因的表達圖式。

　　結論：ripply1可能參與斑馬魚胚胎早期背腹軸的發(fā)生。