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【動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)】-小泛素樣修飾物蛋白酶3調(diào)控小鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞自噬

  目的 探討小泛素樣修飾物特異性蛋白酶3對(duì)小鼠肺組織細(xì)胞自噬的調(diào)控作用及分子機(jī)制。

  方法 應(yīng)用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)SENP3在肺組織細(xì)胞中的定位;對(duì)SENP3基因野生型C57BL/6J小鼠(SENP3+/+)和SENP3基因敲除雜合子小鼠(SENP3+/-)進(jìn)行饑餓處理,誘導(dǎo)細(xì)胞自噬; 應(yīng)用免疫印跡法評(píng)估細(xì)胞自噬水平;應(yīng)用電子顯微鏡觀察和免疫熒光技術(shù)分析發(fā)生自噬的細(xì)胞類型;應(yīng)用免疫共沉淀方法檢測(cè)自噬相關(guān)分子卷曲螺旋狀Myosin樣Bcl-2相互作用蛋白1(coiledcoil myosin-like Bcl-2-interacting protein 1, BECN1)的SUMO化修飾。

  結(jié)果 SENP3在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞中高表達(dá)。小鼠經(jīng)饑餓處理后,肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞出現(xiàn)自噬現(xiàn)象,且SENP3+/-小鼠較SENP3+/+小鼠更明顯。同時(shí),肺組織樣品中BECN1的SUMO2/3化修飾被SENP3去除。

  結(jié)論 SENP3抑制饑餓應(yīng)激時(shí)小鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的自噬,并可對(duì)細(xì)胞自噬程度進(jìn)行精細(xì)調(diào)控。

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