目的 通過對比小鼠孵化囊胚以及其休眠胚胎程序化冷凍并解凍處理前后 Mgst1 基因的相對表達(dá)情況,以及 Mgst1 蛋白的差異表達(dá)分布情況,分析 Mgst1 基因在小鼠胚胎程序化冷凍過程中發(fā)揮的作用,為胚胎抗凍機(jī)理研究提供新的理論基礎(chǔ)。
方法 使用激光共聚焦掃描顯微鏡采集 Mgst1 蛋白在胚胎中表達(dá)分布的免疫熒光圖像;使用 qRT-PCR 技術(shù)鑒定 Mgst1 基因在胚胎中的相對表達(dá)量。
結(jié)果 通過免疫熒光圖像發(fā)現(xiàn),Mgst1 蛋白在小鼠冷凍前后的孵化囊胚與休眠胚胎中均有表達(dá);通過 qRT-PCR 發(fā)現(xiàn),冷凍前的孵化囊胚與休眠胚胎的 Mgst1 基 因相對表達(dá)無顯著差異(P > 0. 05);冷凍后的孵化囊胚 Mgst1 基因相對表達(dá)量較冷凍之前顯著上調(diào)(P < 0. 05);冷 凍后的休眠胚胎 Mgst1 基因相對表達(dá)量較冷凍之前極顯著上調(diào)(P < 0. 01);冷凍后的休眠胚胎 Mgst1 基因相對表達(dá)量較冷凍后的孵化囊胚顯著上調(diào)(P < 0. 05)。
結(jié)論 Mgst1 基因可能在小鼠胚胎抗凍機(jī)制中發(fā)揮著重要的正調(diào) 控作用。