目的 觀察大鼠胚胎期注射綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(GFP-hUCMSCs)在 SD 大鼠肝中存活和肝分化,探索在胚胎發(fā)育期建立人-大鼠嵌合體肝的可行性。
方法 運(yùn)用攜帶綠色熒光蛋白的 慢病毒轉(zhuǎn)染標(biāo)記人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,然后注射到實(shí)驗(yàn)組大鼠胚胎。胎鼠出生后,制作冰凍切片觀察 GFP- hUCMSCs 在肝組織的遷移和分布,同時(shí)免疫組織化學(xué)法檢測人相關(guān)蛋白在鼠肝內(nèi)的表達(dá)。對(duì)照組注射等體積生理 鹽水。
結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組胎鼠出生 45d、75d、120d 的肝組織內(nèi)檢測到 GFP 信號(hào)的分布,對(duì)應(yīng)肝組織內(nèi)可檢測到人肝 細(xì)胞相關(guān)蛋白 ALB、HNF3β 和HNF4α 的表達(dá),但 120d大鼠含量極少、部分甚至檢測不到。對(duì)照組為陰性。
結(jié)論 胚胎期注射 hUCMSCs 的胎鼠出生 75d 的肝內(nèi)仍可檢測到 GFP 信號(hào)的存在和人肝細(xì)胞相關(guān)蛋白 ALB、HNF3β 和HNF4α 的表達(dá),且隨時(shí)間延長而呈現(xiàn)逐漸減少的趨勢。