目的 分離培養(yǎng)裸鼴鼠皮膚成纖維細胞并對其進行鑒定，探討裸鼴鼠皮膚成纖維細胞是否具有分泌外泌體的能力。

　　方法 無菌取新生裸鼴鼠背部皮膚，剪碎成1～2 mm2 大小，將組織塊平鋪于細胞培養(yǎng)皿中，待貼壁后以低糖DMEM（含20%胎牛血清）培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，胰酶消化法對傳代培養(yǎng)細胞進行純化; 通過細胞免疫熒光、蛋白質印跡法檢測波形蛋白表達情況，對成纖維細胞進行鑒定; 待細胞生長至融合度約80%時，改換低糖DMEM（含20%去除外泌體的胎牛血清）培養(yǎng)48 h后收集上清液，超高速離心法分離外泌體，透射電鏡觀察形態(tài)，納米流式分析顆粒直徑，蛋白質印跡法檢測外泌體相關特異性蛋白表達情況，進行外泌體鑒定。

　　結果 新生裸鼴鼠背部皮膚組織塊培養(yǎng)30 h后可見少量細胞自組織塊游離出，培養(yǎng)5 d后可見大量細胞自組織塊游離生長，細胞呈細長梭形或不規(guī)則多角形，放射狀生長。細胞免疫熒光及蛋白質印跡法檢測均證實分離細胞表達波形蛋白。超高速離心法離心細胞上清液，透射電鏡下可觀察到膜狀杯托樣外泌體，納米流式分析粒徑在46.75～206.75 nm，蛋白質印跡法檢測顯示其對外泌體特異性蛋白 CD63、腫瘤易感基因101（tumor susceptibilitv gene，TSG101）和熱休克蛋白70（heat shock protein 70，Hsp70）具有特異性。

　　結論 分離培養(yǎng)的細胞具有成纖維細胞的形態(tài)學特征，并表達成纖維細胞的特征分子波形蛋白。裸鼴鼠皮膚成纖維細胞具有分泌外泌體的能力，為研究裸鼴鼠外泌體所攜帶的生物活性分子及其生物學功能提供了基礎。