目的： 利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)，敲除小鼠黑色素瘤細(xì)胞系的MATP基因，為MATP基因的功能研究奠定基礎(chǔ)。

　　方法： 利用http：//crispr.mit.edu/網(wǎng)站，設(shè)計(jì)針對MATP的特異性引物，并將引物鏈接到pCAS9/gRNA1載體。將陽性載體轉(zhuǎn)染小鼠黑色素瘤細(xì)胞系B16F10，利用無限稀釋的方法獲得轉(zhuǎn)染后的單克隆細(xì)胞株。提取不同細(xì)胞株的基因組，通過測序的方法進(jìn)一步篩選出發(fā)生MATP基因切割的細(xì)胞株，并利用Western-blot的方法驗(yàn)證MATP的表達(dá)情況。

　　結(jié)果： 成功獲得了3株MATP基因敲除的細(xì)胞株，Western-blot結(jié)果表明，該細(xì)胞株不表達(dá)MATP蛋白。

　　結(jié)論： 利用pCAS9/gRNA1載體，可以實(shí)現(xiàn)B16F10細(xì)胞系MATP基因的敲除。