目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細胞(hUCMSCs)移植修復卵巢早衰大鼠卵巢功能的作用機制?
方法:將30只SPF級SD雌性大鼠隨機選取10只作為對照組,其他20只大鼠建立POF模型,模型大鼠分為模型組(10只)和hUCMSCs移植組(10只)?觀察各組大鼠卵泡情況和卵巢組織超微結構的變化,采用ELISA法檢測血清中E2?FSH?AMH?ROS?8-OHdG水平,采用免疫組化和Western blot檢測大鼠SOD1及UCP2的蛋白變化?
結果:HE染色顯示:模型組與對照組比較閉鎖卵泡數(shù)量上升,而生長卵泡數(shù)量下降(均P<0.05),hUMSCs移植組與模型組比較閉鎖卵泡數(shù)量下降,而生長卵泡數(shù)量上升(均P<0.05);卵巢電鏡觀察結果顯示:hUMSCs移植治療后,大鼠卵巢細胞出現(xiàn)細胞核,核膜逐漸恢復,出現(xiàn)少量細胞器;ELISA結果顯示:hUCMSCs移植組血清LH?FSH水平?ROS和8-OHdG生成量較模型組明顯下降(均P<0.05),而
目的:為了探尋國內(nèi)使用量最大的昆明小鼠在特定環(huán)境下,OGTT中比較穩(wěn)定?可靠?合理的禁食時間?
方法:小鼠口服葡萄糖耐受實驗(oral glucose tolerance test, OGTT)是研究其胰島β細胞功能和血糖調(diào)節(jié)能力的方法?實驗前禁食是必要步驟,但在不同禁食時間下,小鼠的空腹和葡萄糖刺激的血糖濃度?胰島素濃度存在一定差異?本實驗選擇6~7周齡大的清潔級昆明雄性小鼠,隨機分為四組,分別禁食4?8?10?12h后實行OGTT,檢測各組小鼠血糖濃度和胰島素濃度,并分析血糖濃度和胰島素濃度的變化趨勢?
結果:(1)所有小鼠血糖濃度和胰島素濃度均從空腹基準值升至臨界值又降至基準值,與禁食4h小鼠的空腹血糖濃度相比,其他三組小鼠的空腹血糖濃度均極顯著的低于禁食4h組的血糖濃度(P<0.01)?(2)從血糖來看,禁食10h組血糖濃度從空腹升臨界值的上升幅度最大,其血糖曲線下面積與禁食4h組相比存在顯著差異(P<0.05)?(3)從胰島素分泌來看,禁食4h的空腹胰島素濃度比禁食8h高4%,大約是禁食12h空腹胰島素的兩倍,禁食8h時的胰島素曲線下面積最小?
結論:昆明小鼠在OGTT中禁食8~10h,血糖濃度和胰島素濃度差異大?分辨率高以及變化趨勢較好;對禁食時間的安排更加合理,實驗計劃合理?高效,以后采用昆明小鼠建立糖尿病模型時,糖耐受實驗的禁食時間可以此作為參考?
與對照組?模型組比較,hUCMSCs移植組E2水平明顯上升(P<0.05);免疫組化結果顯示:與對照組比較,模型組免疫組化UCP-2?SOD1陽性細胞數(shù)增加,而hUCMSCs移植組UCP-2?SOD1陽性細胞數(shù)較模型組減少;Western blot結果顯示:模型組大鼠卵巢組織中SOD1?UCP-2蛋白表達較對照組顯著增加(P<0.05),經(jīng)過hUCMSCs移植治療后,SOD1?UCP-2蛋白水平較模型組明顯下降(P<0.05)?
結論:hUMSCs移植可通過降低SOD1及UCP-2的表達,從而降低氧化應激反應,最終達到修復卵巢功能的作用?