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【動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)】-樹鼩腺病毒Taqman實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用

  目的:通過建立樹鼩腺病毒TaqMan 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)方法,快速準(zhǔn)確地檢測(cè)樹鼩腺病毒。

  方法:根據(jù)TAV 全基因組3’端保守序列設(shè)計(jì)合成特異性引物;用含目的基因片段的重組質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制,建立TAV TaqMan 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)方法。

  結(jié)果:建立的TAV 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)方法特異性好,與樹鼩源及其他物種常見病毒無交叉反應(yīng);方法的最低檢測(cè)限度為每微升3.7 拷貝,靈敏性強(qiáng);相關(guān)檢測(cè)系數(shù)R2 為0.998,擴(kuò)增效率為95.7%;擴(kuò)增結(jié)果具有良好的線性關(guān)系,且重復(fù)性檢測(cè)效果好。

  結(jié)論:成功建立了TAV TaqMan 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)方法,靈敏度高,重復(fù)性好,可用于TAV 感染的早期快速檢測(cè)。

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