目的： 建立一種能在臨床上快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)大鼠疑似泰勒氏病毒的方法，采用TaqMan探針熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qPCR）技術(shù)，特異性針對(duì)TLV病毒核酸進(jìn)行檢測(cè)。

　　方法： 通過(guò)基因合成序列作為質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的模板，同時(shí)選擇特異性的序列在3622~3729 nt處，設(shè)計(jì)一對(duì)引物和TaqMan性探針，優(yōu)化反應(yīng)體系及條件，進(jìn)行qPCR擴(kuò)增，從而建立TLV TaqMan探針qPCR方法，并對(duì)其靈敏度、穩(wěn)定性和特異性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

　　結(jié)果： 建立的TLV qPCR檢測(cè)方法，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，R2值可達(dá)到0.99，靈敏性最低能夠檢測(cè)到10個(gè)拷貝數(shù)/μL，對(duì)比普通PCR方法，高出其100倍；對(duì)其他常見(jiàn)大鼠病毒均無(wú)非特異反應(yīng)；重復(fù)性良好，批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于1%。

　　結(jié)論： 利用TaqMan探針建立快速檢測(cè)TLV的熒光定量PCR方法，該方法具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性好等特點(diǎn)。