目的:繁殖雄性生殖細(xì)胞特異性表達(dá)綠色熒光蛋白小鼠, 為進(jìn)行小鼠生殖系統(tǒng)毒性研究提供有效的工具。
方法:將Ddx4-cre轉(zhuǎn)基因雄鼠與Rosa26mT/mG轉(zhuǎn)基因雌鼠交配, 產(chǎn)生子代動(dòng)物, 利用分子生物學(xué)、組織病理學(xué)及活體成像等技術(shù), 分別從分子、細(xì)胞和組織水平對(duì)子代及其親代小鼠進(jìn)行表型鑒定。
結(jié)果:PCR結(jié)果表明在子代小鼠的睪丸組織中發(fā)生了Cre酶介導(dǎo)的特異性基因重組;活體成像可以看到在F1代小鼠的睪丸組織中具有GFP的表達(dá);睪丸冰凍切片及精子熒光觀察顯示GFP主要表達(dá)于次級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和精子中。
結(jié)論:雄性生殖細(xì)胞特異性表達(dá)GFP小鼠繁殖成功。