目的: 優(yōu)化不同方法刺激THP-1細(xì)胞定向分化為M1、M2巨噬細(xì)胞及DC細(xì)胞,為M1、M2和DC三種體外細(xì)胞模型研究奠定基礎(chǔ)。
方法: 首先用PMA和GM-CSF/M-CSF兩種方法刺激誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分化,再分別添加不同細(xì)胞因子誘導(dǎo)其分化為M1、M2和DC細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)的變化,并用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面分子的表達(dá)情況。
結(jié)果: 兩種方法刺激細(xì)胞CD分子表達(dá)的整體趨勢基本一致。THP-1-M1細(xì)胞表面CD80和CD86表達(dá)量顯著增加;THP-1-M2細(xì)胞高表達(dá)CD163和CD209;THP-1-DC細(xì)胞CD14表達(dá)量顯著降低,高表達(dá)CD80、CD86和CD11c。PMA刺激后,M1、M2和DC細(xì)胞均貼壁生長;GM-CSF/M-CSF刺激后,只有DC細(xì)胞部分貼壁生長,M1和M2細(xì)胞仍呈懸浮生長。
結(jié)論: 兩種方法均能成功地誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞向不同細(xì)胞亞型分化,但是誘導(dǎo)出來的細(xì)胞在形態(tài)上存在一定差異,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇刺激方法。