(1)切片冷風(fēng)吹15 min;
(2)PBS洗2 min×3;
(3)滴 加一抗37 ℃ 1 h,PBS洗2 min×3;
(4)滴加低倍景稀釋液,稀釋的2抗(FITC)37 ℃ 1 h,PBS洗2 min×3;
(5)熒光 封片劑封片。
免疫組化抗原暴露法
蛋白酶K消化法:0.25 mg/ml蛋白酶K滴染37 ℃20 min,PBS 2 min × 3;
胰酶消化法:0.2% 胰酶滴染37 ℃ 20 min,PBS 2 min×3;
胃酶消化法:0.4%胃蛋白酶(p H 2)滴染37 ℃ 20 min,PBS 2 min×3次;
微波加熱枸櫞酸抗原修復(fù)法:用耐高溫的塑料染缸裝200 ml枸櫞 酸抗原修復(fù)液,加蓋微波大火(750 W)加熱2 min沸騰,立刻轉(zhuǎn)為小火(90 W)10 min,自然冷卻至室溫,蒸餾水沖洗2次,入PBS泡2 min;
EDTA抗原修復(fù)法:用耐高溫的塑料染缸裝200 ml EDTA抗原修復(fù)液,加蓋微波大火(750 W)加熱2 min沸騰,立刻轉(zhuǎn)為小火(90 W)10 min,自然冷卻至室溫,蒸餾水沖洗2次,入PBS泡2 min。
(本文轉(zhuǎn)載丁香園)