習(xí)凝膠內(nèi)分離蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)與利用抗原抗體的特異性反應(yīng)的免疫擴(kuò)散技術(shù)結(jié)合起來， 分析鑒定抗原或者抗體的免疫化學(xué)方法。

實(shí)驗(yàn)方法原理
      免疫電泳法（immunoelect rophoresis）是把蛋白質(zhì)電泳分離技術(shù)（瓊脂電泳）和免疫學(xué)檢測技術(shù)（雙向擴(kuò)散）結(jié)合起來的檢測法。此法在微量的基礎(chǔ)上具有分辨率高，靈敏度高， 時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)， 是很理想的分離和鑒定蛋白質(zhì)混合物的方法。用于抗原、抗體定性及純度的測定。在臨床診斷方面也有應(yīng)用價(jià)值。

實(shí)驗(yàn)材料
      人IgG 兔抗人IgG

試劑、試劑盒
      瓊脂 巴比妥鈉 牛血清白蛋白

儀器、耗材
      電泳儀 水平電泳槽 打孔器 微量加樣器 牙簽 載玻片 恒溫水浴 小刀

實(shí)驗(yàn)步驟
   1. 瓊脂板的鋪制

 

       如下圖鋪好瓊脂板，然后按下圖打孔劃槽，電泳時(shí)不要把槽中的瓊脂挑出來（槽的兩縱向平行邊先不劃開）。
 
   2.  加樣
       使瓊脂板的上孔里充滿抗原溶液，下孔里充滿著指示蛋白。
 
   3. 電泳
        同上操作方法，調(diào)電流強(qiáng)度為2～4 mA/cm。當(dāng)指示蛋白質(zhì)到達(dá)濾紙的邊緣時(shí)就可以停止電泳。一般需要40～60 min。
 
   4. 擴(kuò)散 
       電泳結(jié)束后，從瓊脂板中間的槽里用牙簽挑出瓊脂凝膠，并加入免疫血清。將瓊脂板置溫盒內(nèi)（或培養(yǎng)皿中），蓋好蓋子放置一夜。次日可以觀察到凝膠內(nèi)出現(xiàn)的沉淀線。一般情況下每一沉淀線即代表一種抗原成分。根據(jù)沉淀的數(shù)量、位置可以判斷抗原的純度以及抗原蛋白質(zhì)的種類。微量免疫電泳常用于分析樣品的血清成分。
 
5. 觀察 
       免疫電泳的圖譜可以直接觀察到抗原抗體沉淀線，也可以用0.1%的氨基黑染色后觀察。如果需要保存可以拍照。（本文轉(zhuǎn)載丁香園）