金標記技術（immunogold labelling technique）是以膠體金作為示蹤物，應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。膠體金是由氯金酸在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉和鞣酸等作用下，聚合成特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金。
    

       實驗原理：利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。
    

       實驗材料：組織樣品
    

       試劑、試劑盒：免疫金標記物
    

       儀器、耗材：培養(yǎng)箱  顯微鏡
    

       實驗步驟：
       

       1.  將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。
  
       2.  待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。
  
       3.  稀釋的第一杭體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每一載玻片上加40~50 μl 抗體，應能蓋住切片）。
  
       4.  用與泵相連的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并從另一端加上抗體，蓋上加濕盒，室溫溫育1 h。
 
       5.  以PBS冼玻片3次（5 min/次），從切片一端加入新的PBS緩沖液，由另一端吸去舊的緩沖液。
  
       6.  稀釋的第二抗體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每載玻片可加40~50 μl 抗體）。
  
       7.  加免疫金標記第二抗體溫育2 h。
  
       8.  顯微鏡下觀察結果或放密閉玻片盒中，室溫貯放。
 
       9.  顯微鏡下觀察結果，或置玻片盒中貯于4℃。

    （本文轉載丁香園）