免疫印跡（常稱之為Western印跡），可用于檢測單克隆或多克隆抗體識別的抗原。

實驗材料
       蛋白質(zhì)
       試劑、試劑盒      

       轉(zhuǎn)緩沖液               

儀器、耗材

 

 
      5.  準備轉(zhuǎn)印膜，按凝膠大小但各邊都比凝膠大約1 mm 剪膜。成45。地慢慢將凝膠放入蒸餾水中，水將會滲進膜中并潤濕整個表面。然后在轉(zhuǎn)移緩沖液中平衡10~15 min，PVDF膜短暫地在100%甲醇中放一下，然后在轉(zhuǎn)移緩沖液中平衡10~15 min。
      6.  用轉(zhuǎn)移緩沖液濕潤凝膠表面，直接將已潤濕的膜放在凝膠頂部，排去氣泡。
      7.  潤濕另一張Whatman 3MM 濾紙，并置于膜的陽極面，排去所有氣泡，在濾紙的頂部放另一塊Scotch-Brite墊或海綿。
      8.  將轉(zhuǎn)移盒頂部的半面放置適當，扣緊，完成組裝。
      9.  往轉(zhuǎn)移槽中加入轉(zhuǎn)移緩沖液，按正確的極性方向?qū)⑥D(zhuǎn)移盒放進電轉(zhuǎn)儀中，連接電源。

      10.  在冷卻條件下100 V 電轉(zhuǎn)30~60 min，或在冷室中14 V 電轉(zhuǎn)過夜，
      11.  關電源，拆卸轉(zhuǎn)印裝置，取出轉(zhuǎn)印膜，并在膜上剪一小角或用軟性鉛筆或Paper-Mate筆作上標記定位。
      12.  凝膠用考馬斯亮藍染色以確定轉(zhuǎn)移效率。需要時，也可將硝酸纖維素膜或PVDF膜以輔助方案提供的可逆染色方法使蛋白質(zhì)顯跡，也可用如考馬斯亮藍、印度墨墨汁、萘酚藍或膠體金不可逆染色。
      13.  進行蛋白質(zhì)的免疫雜交和顯跡。

  （本文轉(zhuǎn)載丁香園）