重組人α2a/α2b干擾素生產(chǎn)流程中不可缺少的一環(huán)是產(chǎn)品的質(zhì)量監(jiān)控，通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系統(tǒng)檢測(cè)干擾素的生物活性。此系統(tǒng)常由于VSV或細(xì)胞的影響而不夠穩(wěn)定，且檢測(cè)周期較長(zhǎng)。

實(shí)驗(yàn)方法原理
      選用2種針對(duì)rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb，1種McAb作為包被抗體，另1種McAb標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶（HRP）作為結(jié)合物，催化底物顯色。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出待檢標(biāo)本的含量。

實(shí)驗(yàn)材料
      包被抗體   酶標(biāo)抗體   標(biāo)準(zhǔn)品   ABTS底物
      試劑、試劑盒
      緩沖液   洗滌液   稀釋液   終止液
      儀器、耗材
      ELISA板

實(shí)驗(yàn)步驟
      1.  向ELISA板中加入稀釋好的包被抗體100 μl/孔，4 ℃  24～48 h
      2. 洗3次，加入10倍連續(xù)稀釋的待測(cè)標(biāo)本（做4個(gè)稀釋度即可）或倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品（6個(gè)稀釋度）100 μl/孔，37 ℃，1 h
      3.  洗3次，加入稀釋好的酶標(biāo)抗體100 μl/孔，37 ℃，45 min
      4.  洗4次，加入配好的ABTS底物液100 μl/孔，RT，30 min       
      5.  測(cè)410 nm OD
      6.  繪標(biāo)準(zhǔn)曲線

注意事項(xiàng)
      1.  待檢標(biāo)本必須無(wú)污染，無(wú)溶血。
      2.  標(biāo)本稀釋后加入ELISA板時(shí)，注意從低濃度向高濃度依次加入。       
      3.   結(jié)合物稀釋液和底物緩沖液中禁止加入疊氮鈉。

   （本文轉(zhuǎn)載丁香園）