目的:討論針刺結(jié)合人羊膜間充質(zhì)細胞移植對去卵巢骨質(zhì)疏松協(xié)同效應(yīng)研討。
辦法:選擇雌性未孕的Wistar大鼠45只,完整隨機分組分為假手術(shù)組、模型組及實驗組(針刺+人羊膜間充質(zhì)細胞移植),每組各15只。各組手術(shù)傷口恢復(fù)后,第7天開行針刺+尾靜脈注射HAMCs液(假手術(shù)組除外)連續(xù)干預(yù)12周,于末次干預(yù)后24 h,處死大鼠并采集標本。從開端干預(yù)至處死,每周測定1次各組大鼠的體質(zhì)量,雙能X線吸收骨密度儀分別測定左側(cè)股骨中點、遠端和近端骨密度,用原子吸收法測定其骨鈣含量;干預(yù)12周后采用ELISA法檢測血清25-羥基維生素D(25-HVD)、I型膠原C端肽(CTX-I)、骨特異性堿性磷酸酶(BAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的表達變化;干預(yù)12周后檢測各組大鼠生物力學(xué)性能的變化。干預(yù)12周后RT-PCR技術(shù)檢測椎骨中轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)的基因表達狀況。
結(jié)果:假手術(shù)組大鼠體重逐步增加,契合動物自然生長規(guī)律,模型組于造模后兩個月開端,體重卻明顯高于假手術(shù)組,實驗組體重漸增,與假手術(shù)組相近。模型組比擬假手術(shù)組的骨密度和骨鈣含量均降低,差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與模型組較,實驗組的骨密度和骨鈣含量含量均升高,差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。ELISA法顯現(xiàn),血清25-HVD、CTX-I、BAP、TRAP5b的表達,與假手術(shù)組比擬,模型組顯著降低,與模型組比擬,實驗組顯著升高,(P<0.05)。生物法力學(xué)檢測顯現(xiàn),假手術(shù)組的極限載荷、極限應(yīng)力和彈性模量比模型組有顯著增高(P<0.05),實驗組的極限載荷和彈性模量比假手術(shù)組有顯著增高(P<0.05)。RT-PCR檢測顯現(xiàn)TGF-β1的m-RNA的表達,與假手術(shù)組、模型組比擬,實驗組明顯上調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:針刺結(jié)合人羊膜間充質(zhì)細胞(HAMCs)移植具有較好的對去卵巢骨質(zhì)疏松協(xié)同效應(yīng),可改善去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用。