目的： 建立一種評(píng)價(jià)芍藥苷對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度影響的方法.

　　方法： 顯微解剖獲取大鼠背根神經(jīng)節(jié)(DRG),通過(guò)胰蛋白酶消化,過(guò)篩,用DF-12和抗有絲分裂培養(yǎng)液交替培養(yǎng)純化,獲得原代大鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞,并采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)測(cè)定DRG神經(jīng)元細(xì)胞純度;采用激光共聚焦顯微成像技術(shù),觀察細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度的變化,并對(duì)Ca2+熒光強(qiáng)度變化率進(jìn)行分析,探討芍藥苷對(duì)DRG細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度及辣椒素受體的影響.

　　結(jié)果： 采用上述方法分離得到的DRG細(xì)胞純度可高達(dá)95%以上,辣椒平可通過(guò)阻斷辣椒素激活的瞬時(shí)受體電位通道的作用而抑制細(xì)胞內(nèi)Ca2+的增加.芍藥苷表現(xiàn)出與辣椒平類似的作用,可以阻斷細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流.

　　結(jié)論： 芍藥苷可能是通過(guò)作用于TRPV1通道,而抑制DRG細(xì)胞內(nèi)Ca2+大量增加,本方法可以用于評(píng)價(jià)藥物對(duì)大鼠DRG細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的影響.