曰韩欧美亚洲美日更新在线,,,

新浪微博
微信互動

【動物實驗外包服務(wù)】-樹鼬連接黏附分子A的基因克隆及初步功能研究

  目的 獲取樹鼬連接黏附分子A的全長編碼序列并進(jìn)行分子特征分析,探討JAM-A作為呼腸孤病毒受體入侵樹晌原代肺細(xì)胞的作用機制。

  方法 提取健康樹鼬組織總RNA,采用反轉(zhuǎn)錄PCR和cDNA末端快速克隆技術(shù)獲取JAM-4基因; Unipro UGENE分析編碼氨基酸,使用MEGA6.0軟件最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹;實時熒光定量PCR檢測JAM-A在樹剿25個組織和血液中的表達(dá)分布情況;于樹購原代肺上皮細(xì)胞上進(jìn)行受體的特異性抗體阻斷處理,然后采用免疫熒光法觀察病毒抗原對呼腸孤病毒感染的影響。

  結(jié)果 獲取了JAM-A基因cDNA全長序列,2962bp;系統(tǒng)發(fā)育樹進(jìn)化分析顯示JAM-4基因與人的親緣關(guān)系較嚙齒類更近;JAM-A分子廣泛表達(dá)于樹剿的外周組織,而在呼吸道和消化道表達(dá)水平更高。特異性抗體作用于細(xì)胞顯著降低病毒抗原的免疫熒光積分吸光度值(P<0.0001)。

  結(jié)論 首次克隆并分析了JAM-A的基因序列,驗證JAM-A分子是呼腸孤病毒入侵樹刪的主要受體,提示樹晌可作為一種新的呼腸孤病毒動物模型。

上一篇:【動物實驗外包服務(wù)】-小鼠肝炎病毒實時熒光定量PCR方法的建立及在部分嚙齒類動物的應(yīng)用
下一篇:【動物實驗外包服務(wù)】-裸鼴鼠心臟對60Coγ射線輻射耐受的初步研究
分享到: