目的: 利用護(hù)骨素-核因子κB受體活化子-核因子κB受體活化子配體(OPG-RANK-RANKL)系統(tǒng),探討飼糧不同鈣水平對生長期WHBE兔骨代謝影響。
方法: 選擇21只雄性斷奶WHBE兔,隨機(jī)分為3組(I、Ⅱ、Ⅲ組),分別飼以鈣水平為0.95%,1.10%和1.30%,其他營養(yǎng)水平基本一致的飼糧。實(shí)驗(yàn)期42 d。實(shí)驗(yàn)結(jié)束,測定兔血清鈣(Ca)、甲狀旁腺素(PTH)和骨源性堿性酶(BALP)含量;分別運(yùn)用熒光定量PCR法和免疫組織化學(xué)法對WHBE兔骨組織進(jìn)行OPG-RANK-RANKL的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)分析。最后以RANKL/OPG比值為指標(biāo),評估WHBE兔骨代謝與飼糧鈣水平間的相關(guān)性。
結(jié)果: 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,I、Ⅱ、Ⅲ組在血清Ca、PTH含量和BALP活力上差異無顯著性(P>0.05)。WHBE兔骨組織RANKL mRNA表達(dá)水平和RANKL/OPG mRNA比值均以Ⅱ組最低,與I、Ⅲ組差異有顯著性(P<0.05)。鈣水平對WHBE兔骨組織OPG-RANK-RANKL蛋白表達(dá)影響顯著(P<0.01),Ⅱ組和Ⅲ組OPG蛋白表達(dá)陽性指數(shù)均極顯著高于I組(P<0.01);而Ⅱ組兔骨組織RANK蛋白表達(dá)陽性指數(shù)則極顯著低于I組和Ⅲ組(P<0.01),RANKL/OPG的蛋白表達(dá)陽性指數(shù)比值以Ⅱ組最低,與I組差異有顯著性(P<0.01)。此外,WHBE兔骨組織RANKL/OPG mRNA比值和的蛋白表達(dá)陽性指數(shù)比值均與飼糧鈣水平間存在顯著的二次曲線相關(guān)(R2=0.4068,0.8433,P<0.05,P<0.001)。
結(jié)論: 生長期WHBE兔的骨代謝與飼糧鈣水平間呈顯著相關(guān)性,當(dāng)飼糧鈣含量為1.10%時,生長期WHBE兔可獲得較理想的骨代謝水平。