目的 通過對(duì)9d不可預(yù)期應(yīng)激刺激干預(yù)后大鼠的觀察,分析不可預(yù)期應(yīng)激刺激對(duì)胃腸道免疫系統(tǒng)和微生物種群的影響,為慢性應(yīng)激對(duì)胃腸道功能的研究提供參考。
方法 24只SD大鼠隨機(jī)分為空白組和慢性應(yīng)激模型組。 模型組大鼠連續(xù)9d接受不可預(yù)期應(yīng)激刺激。 造模完成后隨機(jī)選擇5只正常組和模型組大鼠,采集其糞便樣本進(jìn)行腸道微生物多樣性分析。 兩組各12只大鼠中,隨機(jī)選取4只進(jìn)行灌流固定,取胃竇、結(jié)腸組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察;其余8只大鼠取血漿和腎上腺組織檢測(cè)其中皮質(zhì)酮的含量。
結(jié)果 (1)9d不可預(yù)期應(yīng)激刺激后,模型組大鼠9d體重增值與正常組大鼠相比明顯減少(P=0.001),模型組大鼠腎上腺組織中皮質(zhì)酮含量與正常組大鼠相比明顯降低(P=0.006);模型組大鼠血漿中皮質(zhì)酮含量與正常組大鼠相比增加(P=0.025)。(2)9d后模型組大鼠的胃黏膜層上皮細(xì)胞排列較正常組稀疏,其厚度與正常組相比減少(P=0. 034);模型組大鼠的胃黏膜固有層中性粒細(xì)胞數(shù)量與正常組相比減少(P=0.016);模型組大鼠的結(jié)腸黏膜中中性粒細(xì)胞數(shù)量與正常組相比增多 (P=0.013)。 3)經(jīng)過 9 d 慢性不可預(yù)期應(yīng)激,Alpha多樣性分析顯示,模型組大鼠糞便樣本OTU中細(xì)菌種類與正常組大鼠相比明顯增加(P=0.001);其中模型組大鼠樣本中脫硫弧菌科和螺桿菌科的占比為與正常組大鼠相比增加 (P= 0.011,P= 0.047);模型組大鼠樣本中類桿菌科的占比與正常組大鼠相比明顯減少,差異具有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P= 0.001)。
結(jié)論 9d不可預(yù)期應(yīng)激刺激可以造成一個(gè)穩(wěn)定的慢性應(yīng)激大鼠模型,慢性應(yīng)激所導(dǎo)致的免疫抑制與大鼠腸道微生物菌群失調(diào)伴隨發(fā)生。