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【動物實驗外包服務(wù)】-PP1γ基因DNA甲基化在學(xué)習(xí)記憶中的作用

  目的: 研究蛋白磷酸酶1γ和DNA甲基化在學(xué)習(xí)記憶中的作用。

  方法: 通過DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNA methytransferases,DNMTs)抑制劑5-aza-cdR處理小鼠,觀察小鼠學(xué)習(xí)記憶情況及其PP1γ表達(dá)變化,通過水迷宮測定小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,Real-time PCR 檢測小鼠海馬區(qū)DNMTs和PP1γ mRNA轉(zhuǎn)錄水平以及Western-Blot測定PP1γ的蛋白質(zhì)表達(dá)水平。為了進(jìn)一步探討5-aza-cdR對小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響是否與細(xì)胞增殖和凋亡有關(guān),用5-aza-cdR 處理NG108-15神經(jīng)細(xì)胞,流式細(xì)胞儀、xCelligence系統(tǒng)和熒光素酶報告基因分別檢測5-aza-cdR對細(xì)胞增殖、凋亡和PP1γ的轉(zhuǎn)錄活性的影響。

  結(jié)果: 側(cè)腦室注射了5-aza-cdR的小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力增加,同時小鼠海馬區(qū)的DNMTs和PP1γ的表達(dá)降低;10 μmol/L 5-aza-cdR抑制細(xì)胞增殖,降低PP1γ的轉(zhuǎn)錄活性,但是沒有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

  結(jié)論: 5-aza-cdR對PP1γ的表達(dá)抑制與小鼠學(xué)習(xí)記憶有關(guān)。

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