目的:利用OPG/RANK/RANKL系統(tǒng)比較研究前肢畸形WHBE兔骨代謝特征。
方法:取WHBE兔、日本大耳白兔、前肢畸型WHBE兔各10只,分為3組,標(biāo)記為HWR(healthy WHBE rabbit)、HJR(healthy Japanese rabbit)和FMWR(forelimb malformation WHBE rabbit)組。用X射線機(jī)所拍攝X-線片觀察各組兔前肢尺橈部形狀并測定平均灰度值;通過骨組織石蠟切片HE染色對前肢骨組織進(jìn)行微觀形態(tài)分析;采用熒光定量PCR法檢測OPG、RANKL基因在肝臟中表達(dá);采用酶聯(lián)免疫法和免疫組化法分別測定OPG/RANK/RANKL蛋白在血清和骨組織中的表達(dá)。
結(jié)果:與HWR和HJR組比較,F(xiàn)MWR組兔前肢尺橈部呈異常彎曲狀,骨皮質(zhì)明顯變薄,X-線片所示灰度值顯著低于HWR組(P<0.05)。FMWR組兔在肝臟RANKL基因表達(dá)水平和RANKL/OPG mRNA比值(P<0.01),血清RANK、RANKL蛋白含量及RANKL/OPG比值(P<0.05,P<0.01),骨組織RANKL蛋白表達(dá)陽性指數(shù)及RANKL/OPG比值(P<0.05,P<0.01)等指標(biāo)上均顯著高于HWR組和HJR組。與HJR組比較,HWR組兔肝臟OPG和RANKL基因表達(dá)水平顯著提高(P<0.05,P<0.01)。
結(jié)論:前肢畸形WHBE兔存在骨質(zhì)量下降、骨組織受損現(xiàn)象,RANKL/OPG比值明顯升高,骨代謝紊亂是其骨骼發(fā)生畸形的主要原因。與日本大耳白兔在RANKL基因表達(dá)水平上的品種差異可能是WHBE兔對前肢畸形易感的誘因。