細胞生長曲線的測定 8問8答
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發(fā)布時間：2017-06-12
1、 問：測定細胞生長曲線的意義是什么？
答：細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數(shù)的常用方法，也是判定細胞活力的重要指標(biāo)，是培養(yǎng)細胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因為細胞太小，無法測單個細胞的生長狀態(tài)，所以測細胞群體的生長曲線。
2、 問：如何選擇細胞接種數(shù)？
答：可根據(jù)細胞傳代培養(yǎng)過程中接種數(shù)及細胞生長周期進行計算，細胞接種數(shù)因細胞的不同而不同。
3、細胞計數(shù)時為什么要用臺盼藍染色？
答：加入臺盼藍后，活細胞不著色，臺盼藍著色的細胞呈深藍色，是不健康或已死亡的細胞，不能計數(shù)。
4、細胞生長曲線測定時為什么要做重復(fù)孔？
答：測定細胞生長曲線細胞計數(shù)時選擇 3 個復(fù)孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作誤差。
5、細胞生長曲線測定周期是幾天？
答：一般是一個星期。
6、為什么繪制的細胞生長曲線沒有達到平臺期？
答：可能有以下原因：一是細胞接種密度過低；二是細胞培養(yǎng)時間過短；三是細胞生長狀態(tài)不好，使其不能正常增殖。
7、為什么細胞計數(shù)第一天，細胞數(shù)沒有增加反而減少？
答：一般細胞傳代后，會有一個生長緩慢的潛伏期，細胞不增殖，而細胞會有正常的死亡，故細胞數(shù)不增加反而減少。
8、細胞生長曲線還有其他方法繪制嗎？
答：當(dāng)然有。我們提到最多的是直接計數(shù)的方法，除此以外還有相對計數(shù)的方法，該類方法首先要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)定細胞數(shù)和某個變量的函數(shù)關(guān)系，然后我們只需要測定每天這個變量的值便可以計算出細胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。
