目的：構建穩(wěn)定過表達的miR-31轉基因小鼠，檢測其主要組織器官中miR-31的表達變化情況并對在體miR-31過表達的應用提供合格的工具鼠。

　　方法：使用Gateway cloning技術構建miR-31過表達載體，使用DNA顯微注射技術將構建好的載體注入受精卵內(nèi)，隨后轉移至假孕母鼠內(nèi)，待其自然生產(chǎn)。將新生小鼠提取尾部DNA，PCR及瓊脂糖凝膠電泳鑒定miR-31過表達陽性小鼠，篩選陽性小鼠并飼養(yǎng)繁殖。另取陽性小鼠，提取主要組織器官的miRNA并使用RT-PCR檢測其miR-31的表達量。同時對比陽性小鼠和野生型小鼠神經(jīng)系統(tǒng)中Nestin的表達和神經(jīng)干細胞的數(shù)量。

　　結果：成功構建了miR-31過表達轉基因小鼠，并在屏障環(huán)境下飼養(yǎng)繁殖至14代以上。各主要組織器官miR-31的表達均升高且穩(wěn)定表達。陽性小鼠Nestin的表達和神經(jīng)干細胞數(shù)量均高于野生型小鼠。

　　結論：通過使用Gateway cloning技術成功構建了miR-31過表達轉基因小鼠，且在各代小鼠中miR-31的表達穩(wěn)定，神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的神經(jīng)干細胞數(shù)量多于野生型小鼠，可為進一步研究miR-31過表達后在體內(nèi)的功能和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療提供良好的工具小鼠。